Helicobacter Test INFAI pre deti vo veku 3-11 rokov, 45 mg Prášok na perorálny roztok

Farmakoterapeutická skupina - Ostatné diagnostické látky, ATC kód: VO4CX

Pre množstvo 45 mg ¹³C močoviny, ktorá sa podáva jednorazovo počas dychového testu, nebola

popísaná farmakodynamická aktivita.

Po perorálnom užití sa označená močovina dostane k žalúdočnej sliznici. V prítomnosti Helicobacter pylori sa ¹³C močovina metabolizuje enzýmom ureázou, ktorý je produkovaný Helicobacter pylori.

enzým ureáza

2H2N(¹³CO)NH2 + 2H2O 4NH3 + 2¹³CO2

Oxid uhličitý difunduje do krvného obehu, odkiaľ je transportovaný ako hydrogenuhličitan do pľúc a uvoľňuje sa vydychovaným vzduchom ako ¹³CO2.

V prítomnosti bakteriálnej ureázy sa pomer ¹³C/¹²C izotopov uhlíka signifikantne zmení. Množstvo ^13CO2 ^{vo vzorkách dychu sa stanoví izotopovou pomerovou hmotnostnou spektrometriou (IRMS) a} hodnotí sa absolutný rozdiel ( ᵝ -hodnota) medzi hodnotami v nultej a tridsiatej minúte.

Ureáza sa tvorí v žalúdku len vplyvom Helicobacter pylori. V žalúdočnej flóre sa len zriedka

vyskytujú iné baktérie, produkujúce ureázu.

Bod rozlíšenia medzi negativitou a pozitivitou prítomnosti Helicobacter pylori, je Δ^ᵝ -hodnota 4⁰/00. To znamená, zvýšenie Δ ^ᵝ -hodnoty nad 4⁰/00 indikuje infekciu. V porovnaní s diagnostikou infekcie Helicobacter pylori pomocou biopsie dosiahol dychový test v klinickej skúške so 168 pacientmi vo veku od 3 do 11 rokov senzitivitu 98,4 % [90 %-CI: ≥ 93,9 %] a špecificitu 98,1 % [90 %-CI:

≥ 95,1 %].

V prípade neprítomnosti bakteriálnej ureázy sa po absorpcii z gastrointestinálneho traktu celé množstvo podanej močoviny metabolizuje ako endogénna močovina. Amoniak, ktorý vzniká pri bakteriálnej hydrolýze, ako bolo popísané vyššie, sa začlení do metabolizmu ako ión NH4⁺.

Perorálne podaná ¹³C močovina je metabolizovaná na oxid uhličitý a amoniak, alebo sa včlení do metabolického cyklu močoviny v organizme. Každé zvýšenie ¹³CO2 sa meria izotopovou analýzou.

Absorpcia a distribúcia ¹³CO2 je rýchlejšia ako reakcia ureázy. Preto je štepenie ¹³C-močoviny ureázou

z Helicobacter pylori krokom, ktorý limituje rýchlosť celého procesu.

Po podaní 45 mg značenej močoviny sa behom prvých 30 minút signifikantne zvýši ¹³CO2 vo vzorke dychu len u pacientov s pozitivitou Helicobacter pylori.

Žiadne

Neaplikovateľné

Čas použiteľnosti je 3 roky.

Uchovávajte pri teplote neprevyšujúce25°C.

Testovacia sada obsahuje nasledujúce súčasti:

a iné zaobchádzanie s liekom

1. Test sa má vykonávať v prítomnosti kvalifikovanej osoby.

2. Pre každého pacienta sa má vyplniť záznamový list s potrebnými údajmi. Odporúča sa, aby bol pacient pri vykonávaní testu v odpočinkovej polohe.

3. Test začína odberom vzoriek na stanovenie základnej hodnoty (v nultej minúte):

   • Z testovacej súpravy vezmite slamku a dve odberové skúmavky so štítkom: „Čas odberu:

     nultá minúta“

   • Odstráňte zátku jednej zo skúmaviek, rozbaľte slamku a vložte ju do skúmavky.

   • Teraz zľahka dýchajte cez slamku, pokiaľ sa vnútorný povrch skúmavky nezarosí.

   • Pokračuje v dýchaní, pritom vytiahnite zo skúmavky slamku a odberovú skúmavku okamžite uzatvorte zátkou.

   • (Ak zostane odberová skúmavka otvorená dlhšie ako 30 sekúnd, výsledky testu môžu byť

     nesprávne).

   • Držte skúmavku vo zvislej polohe a nalepte na ňu štítok s čiarovým kódom označeným

     „Nultá minúta“. Čiary kódu musia smerovať vodorovne

4. Rovnakým spôsobom naplňte dychom druhú odberovú skúmavku (štítok : „Nultá minúta“), tým

   istým postupom.

5. Potom sa má bezodkladne vypiť 100 ml 100% pomarančovej šťavy.

6. Teraz sa pripraví testovací roztok:

   • Vezmite z testovacej súpravy téglik označený „prášok 13C-močoviny“, otvorte ho a naplňte do troch štvrtín objemu pitnou vodou.

   • Téglik zatvorte a opatrne ním trepte, dokiaľ sa prášok nerozpustí. Obsah téglika prelejte

     do pohára.

   • Naplňte téglik s 13C-močovinou až po okraj vodou druhýkrát a tretíkrát a pridajte tento

     obsah do pohára. (Celkový objem vody má byť približne asi 30 ml).

7. Testovací roztok má potom pacient ihneď vypiť a zaznamená sa čas podania

8. 30 minút po podaní testovacieho roztoku sa zozbierajú vzorky s 30-minútovými hodnotami do dvoch odberových skúmaviek, ktoré zostali v testovacom balení (štítok: „Tridsiata minúta“), tým istým postupom ako v bode 3 a 4.

   Pre tieto vzorky použite štítky s čiarovým kódom označené „Tridsiata minúta“.

9. Príslušný štítok s čiarovým kódom nalepte na záznamový list pacientovej dokumentácie. Nakonbalenie uzatvorte a zalepte.

10. Skúmavky so vzorkami sa musia zaslať na analýzu do kvalifikovaného laboratória

    v originálnom balení.

    Analýza vzoriek dychu a špecifikácia testu

    Vzorky dychu, zhromaždené v sklenených alebo plastikových skúmavkách s objemom 10 ml, sa analyzujú izotopovou pomerovou hmotnostnou spektrometriou (IRMS).

    Analýza pomeru ¹³C/¹²C v oxide uhličitom v dychu je integrovanou súčasťou diagnostickej súpravy Helicobacter Test INFAI. Presnosť testu veľmi závisí na kvalite analýzy dychu. Špecifikácia parametrov dychovej analýzy, ako linearita, stabilita (stupeň presnosti referenčného plynu) a presnosť merania sú základom správnej funkcie systému.

    Je treba zaistiť, aby sa analýzy vykonávali v kvalifikovanom laboratóriu. Uplatňujú sa tieto overené

    metódy:

    • Príprava vzorky na IRMS

      Pre stanovenie pomeru ¹³C/¹²C v oxide uhličitom v dychu hmotnostnou spektrometrickou analýzou, je treba oddeliť oxid uhličitý z dychu a zaviesť do hmotnostného spektrometra. Automatický systém prípravy izotopovej pomerovej hmotnostnej spektrometrie, ktorou sa analyzuje dychový test, je založený na plynovo – chromatografickej kontinuálnej prietokovej separačnej technike.

      Voda sa zo vzoriek odstráni buď pomocou vodného uzávera Nafion, alebo systémom prípravy vzorky pomocou plynovej chromatografie, pri ktorom je možné rozdelit jednotlivé plyny na chromatografickej kolóne s héliom ako eluentom. Jednotlivé druhy plynov z dychu prechádzajú kolónou a sú detekované ionizačným detektorom. Frakcia plynného oxidu uhličitého, určená charakteristickým retenčným časom, sa zavádza priamo do hmotnostného spektrometra.

    • Hmotnostná spektrometrická analýza

      Pri analýze separovanej vzorky plynného oxidu uhličitého musia byť jeho molekuly boli ionizované, sústredené do zväzku lúčov, urýchlené v elektrickom poli, odchýlené v magnetickom poli a nakoniec detekované. Týchto päť procesov prebieha v analyzátore hmotnostného spektrometra, ktorý má tri časti: zdroj, trubicu a kolektor. Ionizácia, tvorba zväzku lúčov a urýchlenie prebieha v zdroji, k magnetickému odchýleniu dochádza v trubici a k detekcii v kolektore.

    • Nasávanie vzorky

      Na prívod oxidu uhličitého do analyzátora slúžia početné systémy nasávania vzoriek. Pre analýzu vzorky dychu je nutné individuálne vyváženie oxidu uhličitého vo vzorke k referenčnému štandardnému plynu. Zabezpečuje sa tým vysoká presnosť systému, pretože výpočet obsahu izotopu v oxide uhličitom sa vztiahne na nezávislý štandard.

    • Špecifikácia pre stanovenie pomeru ¹³C/¹²C

      Systém dychového testu je závislý na podaní špecificky značenej ¹³C močoviny. Utilizácia jej

      metabolitu sa monitoruje meraním¹³CO2 vo vydýchnutom plyne.

    • Hmotnostný spektrometer musí byť spôsobilý vykonávať:

      Mnohonásobne opakované analýzy: Minimálne tri opakovania analýzy jednej vzorky počas

      merania

      Bezpečný prístup: Zabezpečené ukladanie pracovných parametrov a výsledkov, ktoré bráni neskoršej manipulácii s dátami

      Úprava: Pomer ¹³C/¹²C s ohľadom na PDB („Pee Dee Beliminate“)

      Cyklus vzorky:< 200 µl

      K základným testom overovania špecifikácií patrí linearita, stabilita (presnosť referenčného plynu) a presnosť merania.

    • Všetky hmotnostné spektrometre na analýzu dychu musia spadať nasledujúce špecifikácie:

Linearita: ≤ 0,5 ⁰/00 pre vzorky dychu s koncentráciou CO2 medzi 1% až 7 %

Stabilita: ≤ 0,2 ⁰/00 pre 10 následných pulzov

Presnosť merania: ≤ 0,3 ⁰/00 pre ¹³C v prirodzenom nadbytku pri použití 10 ml odberových skúmaviek s 3%koncentráciou CO2 v dychu

Helicobacter pylori je prítomný vtedy, ak rozdiel v pomere ¹³C/¹²C základnej hodnoty a hodnoty ^{v tridsiatej minúte presiahne 4,00/}00^.

Je možné použiť inú vhodnú a overenú metódu, vykonávanú v kvalifikovanom laboratóriu.