HELICOBACTER TEST INFAI 75MG Prášek pro perorální roztok

Farmakoterapeutická skupina - Ostatní diagnostika, ATC kód: VO4CX

K provedení dechového testu je podáno množství 75 mg močoviny(¹³C). Její farmakodynamická aktivita nebyla popsána.

Po orálním užití se značená močovina dostane ke gastrické mukóze. V přítomnosti Helicobacter pylori se metabolizuje močovina (¹³C) enzymem ureázou z Helicobacter pylori.

2H2N(¹³CO)NH2 + 2H2O ^{enzym ureáza} 4NH3 + 2¹³CO2

Oxid uhličitý difunduje do krevního oběhu, odkud je transportován jako hydrogenuhličitan do plic a uvolňuje se jako ¹³CO2 , který je vydechován.

V přítomnosti bakteriální ureázy se poměr ¹³C/¹²C izotopů uhlíku signifikantně změní. Množství ^13CO2 ^{ve vzorcích dechu se stanoví měřením izotopových poměrů hmotnostní spektrometrií (IRMS) a} hodnotí se absolutní rozdíl (ᵝ -hodnota) mezi hodnotami v 00-minut a 30-minutami.

Ureáza se tvoří v žaludku jen vlivem Helicobacter pylori. Ostatní ureáza, produkovaná bakteriemi se jen velmi zřídka vyskytne v žaludeční floře.

ᵝ -hodnota 4,0 ‰ je určující pro rozlišení, zda je pacient Helicobacter pylori-negativní nebo pozitivní. Zvýšení ᵝ -hodnoty nad 4,0 ‰ indikuje infekci. Ve srovnání s diagnostikou infekce Helicobacter pylori pomocí biopsie dosáhl dechový test v klinické studii s 457 pacienty citlivosti v rozmezí 96,5% až 97,9% (95%-CI : 94,05% - 99,72%), a specifity v rozmezí od 96,7% do 100% (95%-CI : 94,17% - 103,63%), zatímco v klinických studiích 93 mladistvých ve věku 12 – 17 let, byla dosažena senzitivita 97,7% [90%-Cl: 91,3%] a specifita 96,0% [90%-Cl: 89,7%].

V případě nepřítomnosti bakteriální ureázy se celé množství podané močoviny , po absorpci z gastrointestinálního traktu, metabolizuje jako endogenní močovina. Amoniak, který vzniká při bakteriální hydrolýze, jak bylo popsáno výše, se začlení do metabolismu jako ion NH⁴⁺.

Perorálně užitá močovina-(¹³C) je metabolizována na oxid uhličitý a amoniak, nebo se včlení do metabolických cyklů v organizmu, kde je přítomná močovina. Každé zvýšení ¹³CO2 se měří izotopovou analýzou.

Absorpce a distribuce ¹³CO2 je rychlejší než reakce ureázy. Proto limitující rychlost celého procesu je

štěpení -močoviny (¹³C) ureázou z Helicobacter pylori.

Jen u pacientů Helicobacter pylori -pozitivních se po podání 75 mg značené močoviny signifikantně

zvýší ¹³CO2 ve vzorku dechu během prvních 30 minut.

Žádné

Neuplatňuje se

3 roky

Uchovávejte při teplotě do 25 °C.

1 souprava obsahuje tyto komponenty:

1. Test má provádět kvalifikovaná osoba.

2. Pro každého pacienta je nutné vyplnit formulář s potřebnými údaji. Doporučuje se, aby při provádění testu byl pacient v odpočinkové poloze.

3. Test začíná sběrem vzorků pro stanovení základní hodnoty (v čase 00-minut):

   • Ze soupravy se vezme slámka a dvě zkumavky pro sběr s nálepkou: „Čas sběru:hodnota při 00-minut“

   • Odstraní se uzávěr jedné ze zkumavek, rozbalí se slámka a dá se do zkumavky.

   • Nyní se jemně vydechuje ústy slámkou, dokud se vnitřní povrch zkumavky nezarosí.

   • Pokračuje se v dýchání a současně se vyjme slámka ze zkumavky, která se okamžitě uzavře zátkou.

     (Jestliže zkumavka zůstane otevřená déle než 30 sekund, výsledky testu mohou být

     nesprávné).

   • Zkumavka musí stát kolmo a kolem ní se nalepí štítek s čárový kódem, značícím

     „hodnota 00-minut“. Čáry musí směřovat vodorovně.

4. Naplní se dechem druhá zkumavka pro sběr (štítek : „Čas sběru: hodnota 00-minut“), jak bylo již popsáno.

5. Potom musí pacient bezodkladně vypít 200 ml 100% pomerančové šťávy nebo 1 g kyseliny

   citrónové ve 200 ml vody.

6. Nyní se připraví testovací roztok:

   • Vezme se ze soupravy kelímek se značeným práškem -močoviny(13C), otevře se a naplní do tří čtvrtin objemu pitnou vodou.

   • Kelímek se zavře a opatrně se s ním třepe, dokud se prášek nerozpustí. Objem kelímku se přeleje do sklenice na pití.

   • Kelímek se znovu naplní až po okraj vodou a přeleje se do sklenice. Tento postup se opakuje celkem třikrát. (Celkový objem vody má být asi 30 ml).

7. Pacient musí okamžitě vypít tento testovací roztok a zaznamená se čas podání.

8. 30 minut po podání testovacího roztoku (bod 7.) naplní pacient dechem dvě zkumavky pro sběr, které zůstaly v soupravě (štítek: „Čas sběru: hodnota 30 minut“), jak bylo popsáno v bodě 3 a 4.

9. Pro tyto vzorky se použije čárový kód značící „30 minutová hodnota“.

   Stejný čárový kód se nalepí na formulář pacientovy dokumentace. Nakonec se balení uzavře a

   zalepí.

10. Zkumavky se vzorky se musí zaslat v originálním balení na analýzy do speciální laboratoře.

    Analýza vzorků dechu a specifikace testu pro laboratoře

    Vzorky dechu, shromážděné v 10 ml skleněných nebo plastikových zkumavkách se analyzují měřením izotopových poměrů hmotnostní spektrometrií (IRMS).

    Analýza poměru ¹³C/¹²C v oxidu uhličitém, přítomném v dechu je integrovanou součástí diagnostického kitu Helicobacter Test INFAI. Přesnost testu velmi závisí na kvalitě analýzy dechu. Specifikace parametrů hmotnostního spektrofotometru jako linearita, stabilita (přesnost referenčního plynu) a přesnosti měření jsou základem správnosti systému.

    Je nutné zajistit, aby analýzy byly provedeny ve specializované laboratoři. Validovaná metoda je prováděna následovně:

    • Příprava vzorku pro (IRMS)

      Pro stanovení poměru ¹³C/¹²C v oxidu uhličitém v dechu hmotnostní spektrometrickou analýzou, je nutné oddělit oxid uhličitý z dechu a zavést do hmotnostního spektrometru. Automatický systém přípravy měření izotopových poměrů hmotnostní spektrometrií, která je určena pro analýzu dechového testu, je založen na kontinuální separační technice pomocí plynové chromatografie.

      Voda se ze vzorku odstraní buď pomocí zachytávače vody „Nafion“, nebo systémem přípravy vzorku pomocí plynové chromatografie. Na chromatografické koloně s heliem jako rozpouštědlem je možno rozdělit jednotlivé plyny. Vzorky dechu procházejí kolonou a jednotlivé plyny jsou detekovány ionizačním detektorem. Frakce oxidu uhličitého, identifikovaná charakteristickým retenčním časem je zaváděná přímo do hmotnostního spektrometru.

    • Hmotnostní spektrometrická analýza

      K analýze odděleného vzorku oxidu uhličitého v plynném stavu je třeba, aby jeho molekuly byly ionizované, vytvořily svazek paprsků, urychlený v elektrickém poli, odchýlený v magnetickém poli a nakonec detegovaný. Těchto pět procesů probíhá v analyzátoru hmotnostního spektrometru, který obsahuje tři oddělené sekce: zdroj, tubu a kolektor. Ionizace, tvorba svazku paprsků a urychlení probíhá ve zdroji, magnetické odchýlení probíhá v tubě a detekce v kolektoru.

    • Nanášení vzorku

      Přístroj má speciální vstupní systém umožňující nástřik mnoha vzorků oxidu uhličitého do analyzátoru. Pro analýzu vzorků dechu je rozhodující individuální rovnováha oxidu uhličitého ve vzorku k referenčnímu standardu plynu. Výpočet obsahu izotopu v oxidu uhličitém, vztažený na nezávislý standard zajišťuje vysokou přesnost a správnost systému.

    • Specifikace pro stanovení poměru ¹³C/¹²C

Principem dechového testu je podání značené ¹³C močoviny, jejíž metabolit je monitorován měřením

¹³CO2ve vydechnutém plynu.

Hmotnostní spektrometr musí být způsobilý provádět:

Mnohonásobně opakované analýzy: Nejméně 3 opakované analýzy stejného vzorku v průběhu

měření

Systém bezpečnosti: Bezpečné uložení operačních parametrů a výsledků k jejich

dalšímu zpracování

Adjustace: poměr ¹³C/¹²C s ohledem na PDB („Pee Dee Beliminate“)

Nanášení vzorku: < 200 µl

Základní principy pro ověření specifikace jsou linearita, stabilita (přesnost referenčního plynu) a přesnost měření.

Všechny hmotnostní spektrometry pro analýzy dechu musí vyhovovat následujícím specifikacím: Linearita: ^< 0,5 ‰ pro vzorky dechu s koncentrací CO2 mezi 1% až 7%

Stabilita: < 0,2 ‰ pro 10 následných pulzů

Přesnost měření: < 0,3 ‰ pro ¹³C v přirozeném nadbytku při použití 10 ml ^{zkumavek pro sběr vzorku dechu s 3% koncentrací CO}2 ^v dechu

Helicobacter pylori je přítomen tehdy, když rozdíl v poměru ¹³C/¹²C základní hodnoty a 30 minutové

hodnoty přesáhne 4,0 ‰.

Alternativně je možné použít jiné vhodné validované metody, prováděné v kvalifikované laboratoři.